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降落PCR:解决PCR扩增问题的新方法 降落PCR,也被称为TouchDown PCR,是一种常见的PCR优化方法,操作简单且效果显著。MedPeer网站上有详细的解释和视频教程,供大家参考。 𘠐CR扩增原理 在PCR扩增过程中,DNA双链解螺旋成单链后,引物在退火温度下特异性结合到DNA单链上,并在Taq酶的作用下进行延伸。退火温度越高,引物结合的特异性越好;退火温度越低,非特异性片段产生的可能性越高。 𘠩落PCR的优势 降落PCR通过设定一个较高的初始退火温度,并在每个循环中逐渐降低温度,使得在前期的高温下扩增出特异性片段,而在后期的低温下提高PCR的特异性和效率。 𘠐CR体系配置(以20ul体系为例) 2x Taq Mix:10ul 引物F/R:0.5ul(可在0.5上下调整) 模板:2ul(如果PCR条带不够亮,可以增加一点模板) 加水至:20ul 𘠐CR程序设置 预变性:94℃ 3min 循环1:94℃ 30s 循环2:65℃ 30s 循环3:72℃ 30s(10个循环,每个循环退火温度降低1℃至55℃) 循环4:94℃ 30s 循环5:55℃ 30s 循环6:72℃ 30s(20-25个循环) 延伸:72℃ 10min 保存:4℃至取出跑胶 𘠥ꌦ术和方案 以前做实验前需要查找文献和毕业论文来确定实验方案,做的时候对原理和步骤依旧模糊不清。好在MedPeer网站上提供了各种实验的详细介绍和视频教程,如果早知道这些资源,就不用巴巴地求着师兄师姐和同学教了。
在申请UL认证时,UL 申请表上的“申请人、制造商、列名者”是什么意思? 在申请UL(Underwriters Laboratories,保险商试验所)认证时,理解申请表上的“#申请人#”、“制造商”和“列名者”这三个术语至关重要,它们各自代表不同的角色和责任。以下是安可捷检测认证这三个术语的优化解释: 申请人(Applicant):向UL 认证申请零件、产品或系统认证的公司或个人,必须承担产品测试及后续检验服务费用,并有权利取得测试结果的信息。 制造商(Manufacture):负责维护及运作生产工厂的公司或个人,已列名(或其它)产品在此生产工厂制造或组装,UL 的后续检验服务也在此工厂执行符合性评估稽核。请一并列出负责相关生产作业的全部制造商地点。 列名者(Listee):产品上所使用或与产品结合的公司或个人名称,这个名称出现在UL 的产品目录中,也出现在UL网站上可搜寻的线上数据库中。“分类公司”或“认可公司”等同于列名者,并且会用在其它UL Solutions的服务中。 登记的“申请人”、“制造商”、“列名者”可以来自不同的公司或组织。在某些情况下,同一个产品可以登记在两个以上的制造商或列名者中。 申请人是启动认证流程的一方,制造商是负责生产的一方,而列名者则是产品通过认证后在市场上代表产品合规性的实体。这三个角色在UL认证过程中各自承担着不同的责任和义务,共同确保产品的安全性和合规性。
PAGE染色优化,实验大不同! 自1959年Raymond和Weintraub首次使用聚丙烯酰胺作为电泳介质以来,聚丙烯酰胺凝胶已成为生化实验中最常用的支持介质。在蛋白质组学试验中,蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳后的染色是一个至关重要的环节。以下是一些优化PAGE染色的实验策略: 电泳条件优化 高温制胶可能会产生小气泡,因为高温下凝胶聚合反应瞬间完成,导致灌胶时气泡排除不及。而低温制胶则可能导致凝胶混浊且脆性增强。建议选择APS:TEMED配比1:10的条件,这样既能保证凝胶的质量,又能避免气泡的产生。 染色条件优化 芥襸𘨧银染显影体系中,AgNO3、CH2O和Na2CO3的使用量对显带效果有显著影响。通过试验发现,AgNO3使用量0.1%,CH2O使用量1mL,Na2CO3使用量0.2g,上样量1-2uL的体系效果最佳。 PAGE类型选择 PAGE分为变性聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)和非变性聚丙烯凝胶电泳(native-PAGE)。SDS-PAGE添加了SDS和疏基乙醇变性剂,并在加热条件下将聚合蛋白质充分变性为亚基进行分离。而非变性电泳不含变性剂,多在低温条件下对天然构象的蛋白质进行分离。非变性电泳分离乳蛋白质的条带虽然较少,但对清蛋白的分离效果良好,更能明显区分乳清蛋白。 参考文献 The Improvement on the Method of Separating Leaf Proteins in Arabidopsis by SDS Polyacrylamide Gel Electrophoresis. Investigation of protein staining protocols of SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The study of the differences between cow and goat milk proteins by SDS-PAGE and native-PAGE. Research on Influence Factor of Non Denatured PAGE Technology of Chinese Cabbage. 通过这些优化策略,可以有效提高Western blot中PAGE染色的实验效果,确保数据的准确性和可靠性。
#大模型日报# ai前沿动态 【通过多任务学习实现松弛等变性】 链接: 论文概述:本文提出 REMUL,一种通过多任务学习在无约束模型中学习近似等变性的新方法,在多个几何数据任务上实现了显著的计算效率提升和与等变基线模型相当甚至更好的性能,并揭示了无约束模型更凸的损失面可能带来的优化优势。
IC646RFFV350是一款由宁德润恒自动化设备供应的高性能工业控制模块,专为满足复杂工业自动化需求而设计。该模块采用了先进的微处理器技术,具有高效的数据处理能力和灵活的配置选项,广泛应用于制造业、能源管理、交通控制等领域。 核心参数 处理器:32位高性能微处理器,主频高达400MHz,确保快速响应和高效运算。 内存:内置128MB RAM和256MB Flash存储,支持数据的高速存取与程序的稳定运行。 输入/输出(I/O):提供多种I/O接口,包括16路数字量输入、8路数字量输出、4路模拟量输入和2路模拟量输出,支持多种信号类型。 通信接口:配备2个以太网口和4个串行通信口(RS-232/RS-485),支持Modbus/TCP、EtherNet/IP等主流通信协议,实现设备间的无缝连接。 电源:宽范围电源输入(24VDC Ⱡ20%),具备过压保护和反接保护功能,确保系统稳定运行。 工作环境:工作温度范围为-20℃至60℃,相对湿度为5%至95%(无凝露),适应各种工业现场环境。 尺寸与安装:尺寸为220mm㗱65mm㗴5mm,采用标准DIN导轨安装方式,安装便捷,维护简单。 功能特点 实时控制:支持实时多任务处理,确保控制指令的快速准确执行。 故障诊断:内置故障诊断功能,实时监控系统状态,快速定位故障点,减少停机时间。 数据记录:支持数据记录与追溯功能,便于生产过程分析与优化。 安全认证:通过CE、UL等国际安全认证,确保产品安全可靠。 编程环境:支持多种编程语言,包括梯形图、结构化文本等,简化编程难度,提高开发效率。 应用场景 智能制造:应用于生产线的自动化控制,提高生产效率和产品质量。 能源管理:用于电力监控与能源管理系统,实现能源的优化配置与使用。 交通控制:在交通信号灯控制、智能交通系统中发挥重要作用,提升交通效率与安全性。 环境监测:应用于环境监测设备,实时监测环境参数,为环境保护提供数据支持。#宁德润恒自动化设备有限公司#
Intel CPU后缀,一文秒懂! 在查看电脑配置时,你是否曾注意到CPU型号后面的字母?这些字母代表了不同的设计和性能优化。让我们一起来了解Intel CPU后缀字母的含义吧! 性能等级:数字越大,性能越强。例如,i5 12600H中的12600代表了处理器等级,数字越大,性能越高。 砥缀字母: K:高性能,未锁频,适合超频爱好者。 T:功耗优化,适合需要长时间运行的用户。 X/XE:特别版,高性能,未锁频。 E:嵌入式设备专用,能效更高。 HE:高性能,适合嵌入式设备。 UL:高能效,采用LGA封装。 HL:性能极佳,采用LGA封装。 씨짔/迷你主机CPU后缀: HX:最高性能,所有SKU未锁频。 HK:最高性能,所有SKU未锁频。 H:性能最卓越,针对轻薄型笔记本电脑优化。 U:能效更高。 Y:功耗极低。 G1-G7:显卡级别,采用较新集成显卡技术。 通过这些信息,你可以更好地理解Intel CPU的命名规则和性能差异。下次在查看电脑配置时,不妨多留意一下这些细节,它们将帮助你做出更明智的选择!
中兴远航41内置5000mAh电池,搭载的展讯T7520芯片具有低功耗的特性,使得该机在满电情况下可连续待机356个小时、连续播放音乐80个小时、刷短视频时可达8.5小时,微信通话6.5小时,16小时的5G通话,同时手机提供多种省电模式,再也不用担心电量焦虑了,遗憾的是充电给力只有18W快充。 在设计在外观上,中兴远航41延续了简约大气的风格,采用一体化机身设计,流线感十足,后置相机模组采用了居中奥利奥设计,辨识度高。搭配一体化机身和曲线后壳设计,提升了整机的质感和颜值。 中兴远航41采用6.52英寸的LCD屏,支持了90Hz刷新率和UL低蓝光权威护眼认证,为用户提供了流畅的视觉体验,适合观看视频与日常使用。 中兴远航41前置800万像素摄像头,后置1300万像素AI双摄,前利用人工智能引擎的支持,该手机可以实现AI场景识别、夜景优化、人像分割等多种拍照功能,拍出更为出色的照片。 中兴远航41中兴远航41还有多场景超级音量,支持双重AI算法,能够稳固提升手机的音量,至高提升到200%。看视频、来电或是播放音乐都十分清晰洪亮,它保留了3.5毫米耳机孔,对于习惯使用有线耳机的用户来说是一个不小的福音。 中兴远航41针对长辈们使用手机的场景,中兴远航41还在系统方面做了不少优化,比如系统提供简易模式、支持一键拨号、支持快捷扫码、支持语音助手用聊天软件等,送给父母来使用非常合适。 目前,中兴远航41正在热销中,顶配8GB(扩展后可达14GB)+256GBNFC版本仅售699元,而8GB+128GB版本也才599元!这样的价格,这样的配置,这样的体验,你还在等什么呢?赶紧购买作为礼物送给长辈!
LG 4K显示器,生产力翻倍! 最近疫情期间,澳洲的学校都开始上网课了,大家都在家里一边查资料、写代码,一边看上课录像、记笔记。这时候,一个大屏幕的显示器就显得特别重要了。 其实我也纠结了好久,到底是选2K还是4K的显示器。最后还是选择了4K,主要是因为2K显示器连MacBook Pro的时候无法开启HiDPI,体验感太差了。于是果断入手了LG的4K显示器——UL600。这款显示器在保证面板参数和高端型号UL850一致的前提下,省掉了Type C接口和可调节支架,基本上就是保证了面板,其他能省的都省了。当然,如果你预算充足,还是建议直接上UL850。 生产力的提升 说到生产力,这款4K显示器真的是让我爱不释手。首先,它的分辨率超高,像素点几乎看不出来,再加上Mac OS字体的优化,看文本和代码简直是一种享受。每次用这款显示器学习,我都觉得自己仿佛爱上了学习(误)。而且它的色准也很棒,基本上可以和MacBook自带的显示器媲美,每次点亮屏幕都有种惊艳的感觉。 娱乐体验 슊除了生产力提升,这款大屏幕在娱乐方面也是一绝。看片儿自然不用多说,爽就完事儿了。油管上看4K视频简直不要太安逸。值得一提的是,这款显示器还支持HDR400,有PS4 Pro的朋友们也可以放心入手。4K显示器可以向下兼容1080p的信号输出,所以没事接上Switch刷刷《动森》也是很舒服的。 总结 总的来说,这款LG 4K显示器真的是提升幸福感和生产力的神器。无论是学习还是娱乐,都能带来极致的体验。如果你也在纠结要不要升级显示器,不妨试试这款LG UL600,绝对不会让你失望!
载体构建攻略犰젨𝓦建全流程 目的基因的扩增 首先,从NCBI上找到目的基因的核苷酸序列,利用Snapgene设计引物。通常在序列的前后各选20-25bp作为上下游引物。先用普通MIX进行退火温度优化,然后使用高保真酶(如诺维赞的2X Phanta⮠Max Master Mix)进行50uL体系的扩增。若需要高浓度,可扩增两管。 连接 连接目的基因与载体可选择T4连接酶,需在目的基因两端设计酶切位点和保护碱基(注意这些位点不能出现在片段内,以免片段被内部切开)。也可选择无缝克隆方式,利用同源重组原理,在引物5'端加入载体的同源臂,引物顺序为同源臂+酶切位点+基因引物。我个人偏爱这种方式,省时方便。本次使用的是诺维赞的ClonExpress⮠II One Step Cloning Kit连接酶,9个片段一次性连接成功。20uL的连接体系在37℃作用30 min,取10 uL用于转化。 目的基因与载体的比例 本次使用的载体是PcDNA3.1(5500bp),基本50ng的载体就足够了。ClonExpress⮠II One Step Cloning Kit试剂盒推荐的载体和片段的摩尔比为1:2,例如片段500bp,浓度5ng/uL,载体5000bp,浓度25ng/uL。则片段摩尔数是载体的2倍,片段需要2㗵=10ng,即2uL。 转化 取10 uL连接产物转化DH5a。 阳性克隆的筛选 在1.5mL的EP管中加入800 uL的氨苄LB,用10uL的枪头把单个菌落全部占走,打入EP管中,震荡培养4h。一般选择8个克隆。4h后进行菌液PCR鉴定阳性克隆,选择2个送测序。 注意事项 移码问题:选择酶切位点时注意是否会引起目的基因的移码,可用Snapgene模拟。 感受态:购买的商品化感受态可一支当两用,否则太浓不好挑选。自制的感受态在使用前需设置阳性对照,排除感受态质量问题。 终止密码子和起始密码子:用于蛋白表达的目的基因需从ATG开始,以终止密码子结尾。 砦建小贴士 退火温度优化:对于高保真酶,退火温度至关重要,可通过梯度PCR找到最佳温度。 引物设计:选择合适的引物长度和位置,确保扩增效率和特异性。 连接效率:优化连接体系,确保目的基因与载体的高效连接。 筛选策略:通过多个克隆的筛选,提高阳性克隆的比例。 通过以上步骤,你可以顺利构建出含有目的基因的载体,为后续实验打下坚实基础。
程序员日常笑话集,笑到肚子疼 改不完的bug,做不完的需求,笑着笑着就哭了⊊试图找到代码中的BUG时,发现到处都是 此功能将来必改,不要写死 战力可视化:Assembly、C++、PythonꊇitHub的网红浴室 项目经理、客户、老板的deadline、bug、我,打开音乐软件뤺夸序员的一天是Lo-fi Coding,实际上是Lo-fi Coding 观光客:好棒的夜景,正在爆肝的本地人想回家 20世纪60年代的程序员 vs 21世纪的程序员:Google、CSDN、Stackoverflow、Github、TioAKE、Ce(ie ulnas) 有了这段程序,我们可以飞到月球再回来 以前的我:一定还有更优雅的实现方法,这里还可以优化一下。现在的我:管他呢,能跑就行𖢀♂️ 被你迭代了多次的代码 ME JavaScript、Java、Php、Python𛊤我 vs 父母眼中的我 vs 我眼中的我 vs 实际上的我:Ya-YLA Google Howto use dates in Javascript
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